Determinació del contingut d'àcid oxàlic en fruites i verdures mitjançant cromatografia líquida d'alta resolució (HPLC)
1. Principi experimental i disseny del mètode
Com a àcid orgànic comú en fruites i verdures, el contingut d'àcid oxàlic afecta directament el gust i el valor nutricional dels aliments. Aquest experiment utilitza cromatografia líquida d'alta resolució de fase inversa (RP-HPLC). En condicions de fase mòbil àcida, l'àcid oxàlic se separa a la línia de base de les substàncies interferents mitjançant una columna cromatogràfica C18. Per a l'anàlisi quantitativa s'utilitza un detector ultraviolat fixat a 210 nm, basat en les característiques d'absorció UV dels grups carboxil de les molècules d'àcid oxàlic.
2. Corba estàndard i preparació de la mostra
Per preparar solucions estàndard s'utilitza un mètode de dilució en gradient: peseu amb precisió 25,0 mg d'àcid oxàlic dihidratat i diluïu-ho a 25 mL amb aigua ultrapura per obtenir una solució madre d'1 mg/mL. Aquesta es dilueix seqüencialment en una sèrie de solucions estàndard a 50, 100, 200, 400 i 800 µg/mL, amb cada concentració injectada per triplicat.
Per a la preparació de la mostra, s'utilitza l'extracció assistida per microones: pesar 5,00 g d'homogenat de fruita/verdura, afegir 10 mL de solució d'àcid clorhídric a 0,1 mol/L, tractar a 60 °C amb microones durant 10 minuts, filtrar a través d'un filtre de membrana de 0,45 µm i recollir el filtrat per a la seva anàlisi.
3. Optimització de les condicions cromatogràfiques
La fase mòbil és un sistema tampó de fosfat dihidrogenat de potassi de 0,01 mol/L (pH 2,5)-acetonitril (95:5), amb un cabal de 0,8 mL/min i una temperatura de columna de 35 °C. L'ajust de la proporció d'acetonitril mostra que quan la fase orgànica supera el 10%, el temps de retenció de l'àcid oxàlic s'escurça a menys de 3 minuts, però es produeix una cua del pic. En les condicions finals optimitzades, el temps de retenció de l'àcid oxàlic és de 4,2 minuts, aconseguint una separació completa de l'àcid cítric i l'àcid màlic adjacents (resolució > 1,5).
4. Validació del mètode
La verificació del rang lineal mostra una bona relació lineal entre l'àrea del pic i la concentració en el rang de 10–1000 µg/mL (R² = 0,9993). El límit de detecció (LOD), determinat pel mètode de la relació senyal-soroll, és de 0,5 µg/mL. En les proves de repetibilitat, la RSD per a sis determinacions repetides de la mateixa mostra d'espinacs és de l'1,8%. Els experiments de recuperació de pics a tres nivells (80%, 100% i 120%) donen recuperacions mitjanes del 98,2%, 102,4% i 97,8%, respectivament, complint els requisits per a l'anàlisi quantitativa.
5. Anàlisi de mostres reals
Es van analitzar sis fruites i verdures disponibles comercialment: espinacs (356 ± 12 mg/100 g), api (215 ± 9 mg/100 g), tomàquet (18 ± 2 mg/100 g), poma (6 ± 1 mg/100 g), plàtan (no detectat) i bròquil (89 ± 5 mg/100 g). Una comparació amb el mètode estàndard nacional (GB 5009.277-2016) mostra que la desviació relativa entre els dos mètodes és inferior al 5%, cosa que verifica la fiabilitat d'aquest mètode. En particular, el mètode HPLC presenta una sensibilitat més alta que els mètodes de valoració tradicionals a l'hora d'analitzar mostres de baix contingut.
6. Notes clau
Controleu estrictament el valor del pH durant el pretractament de la mostra. Si el pH de l'extracte supera 3, la precipitació d'oxalat de calci comportarà resultats baixos de la prova. La fase mòbil s'ha de preparar fresca diàriament per evitar la precipitació de sal i el bloqueig de la columna. Després de cada 20 injeccions, renteu la columna amb acetonitril-aigua (30:70) durant 30 minuts per evitar la degradació de l'eficiència de la columna. Per a mostres que contenen pigments (per exemple, col morada), es recomana afegir un pas de purificació per extracció en fase sòlida abans de la injecció.
7. Instruccions d'aplicació i expansió
Aquest mètode es pot estendre a la detecció d'àcid oxàlic en mostres biològiques com l'orina i la sang. Ajustant la composició de la fase mòbil (per exemple, afegint hidròxid de tetrabutilamoni), es pot determinar simultàniament l'àcid oxàlic i els seus metabòlits. Combinat amb un detector d'espectrometria de masses, es pot establir un mètode de detecció de traces més precís. En la indústria de processament d'aliments, aquest mètode pot proporcionar un suport de dades important per a la selecció de varietats amb baix contingut d'àcid oxàlic i l'optimització dels processos de cocció.
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. – Àcid oxàlic
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. és un proveïdor i exportador fiable d'àcid oxàlic d'alta qualitat (grau industrial, 99,6% mín.) de Shandong, Xina. El nostre àcid oxàlic és un sòlid cristal·lí blanc, també conegut com a àcid etanodioic, amb la fórmula molecular C₂H₂O₄. Presenta una alta puresa, poques impureses i una qualitat estable en tots els lots, satisfent les demandes de les indústries tèxtil, del cuir, de la metal·lúrgia, del processament de terres rares, de la neteja química i de la construcció.
Subministrem àcid oxàlic anhidre i dihidrat, disponible en sacs de 25 kg, sacs de 50 kg i sacs a granel de 1000 kg. Amb procediments estrictes de control de qualitat, informes de proves complets i plans de subministrament flexibles, garantim un lliurament estable i un rendiment constant per als compradors globals. Els nostres productes s'han exportat àmpliament al sud-est asiàtic, Europa, Àfrica i Amèrica, i han obtingut reconeixement per la seva qualitat fiable i preus competitius.
Trieu Zibo Anhao Chemical per a un subministrament fiable d'àcid oxàlic i un servei químic professional integral.
Trieu Zibo Anhao Chemical per obtenir àcid oxàlic d'alta puresa que ofereixi un rendiment estable i valor per al vostre negoci. Poseu-vos en contacte amb nosaltres per a comandes a granel o especificacions tècniques: info@anhaochemical.com
